产品货号:
GS0134
中文名称:
BL21感受态细胞
英文名称:
BL21 Competent Cells
产品规格:
5×100μl|10×100μl
发货周期:
1~3天
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BL21(DE3)、Rosetta、OrigamiB(DE3)等一系列原核表达菌株均来源于BL21菌株。该菌株主要用于非毒性蛋白的表达,不含T7 RNA聚合酶,所以不能用于由T7启动子驱动的蛋白表达(如:pET系列);但含有大肠杆菌RNA聚合酶,可以用于tac或trc等使用大肠杆菌RNA聚合酶的原核系统的表达,如:pGEX,pMAL。
BL21感受态细胞经特殊工艺制作,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,转化效率可达107 cfu/μg DNA。
组分 | 5×100μL | 10×100μL |
BL21感受态细胞 | 5×100μL | 10×100μL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-80℃,有效期6个月。
基因型:
E.coli B F- dcm omp T hsdS(rB- mB-) gal [malB+]K-12(λS)
- 使用1ng的质粒DNA进行转化时:100μL E.coli BL21 Competent Cells/1ng pUC19 Plasmid进行转化时产生的菌落数>1×106 transformants/1μg pUC19 Plasmid。
- 100μL的E.coli BL21 Competent Cells在含有100μg/mL Ampicillin的L-琼脂平板培养基上过夜培养40 hr不产生菌落。
- 感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存,不可多次冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
- 所有步骤均在无菌条件下操作。
- 不适合在液氮中保存。
- 从-80℃冰箱内取出BL21 Competent Cells,迅速插入冰盒内,使其溶解。
- 加入DNA样品轻轻混匀,冰中放置30分钟。
- 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中放置2分钟左右,注意不要晃动。添加700μL不含抗生素的无菌培养基,混合均匀。
- 37℃振荡培养1小时(160~225rpm),吸取适量体积均匀涂布到含相应抗生素的LB琼脂培养基平板中。37℃正置至液体被吸收,然后倒置过夜培养。
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